基因敲降
是指在细胞或生物体中通过RNA干扰（RNA interference，RNAi）等方法降低目标基因表达水平，使其功能受到抑制。RNAi通常通过合成人工转录后小干扰RNA（siRNA）或利用稳定的反义RNA（shRNA）介导靶向降解mRNA来实现。由于RNAi的效果通常是部分抑制目标基因的表达，因此被称为基因敲低。基因敲低可以帮助研究者探究特定基因的生物学功能、代谢途径等，是一种常用的基因功能研究方法。
基因敲降载体：
（1）siRNA载体：短小的干扰RNA序列，通过RNAi途径靶向RNA降解或保护mRNA免受翻译；
（2）shRNA载体：较长的干扰RNA序列，可以形成稳定的hairpin结构，通过RNAi途径实现靶向RNA降解或保护mRNA免受翻译，有效性比siRNA更高；
（3）CRISPRi载体：包含CRISPRi靶向序列和转录抑制子，通过抑制靶向基因的转录水平实现基因敲低效果。
基因敲降载体的构建方法：
（1）设计目标基因的干扰序列，通常采用在线设计工具或经验公式来计算；
（2）合成干扰序列的DNA或RNA片段，克隆到转录载体中，生成siRNA或shRNA表达载体；
（3）将siRNA或shRNA表达载体转化至大肠杆菌中，进行筛选鉴定；
（4）提取筛选出的重组质粒，通过腺病毒、腺相关病毒等途径将其导入到目标细胞中。